Coriell Institute細胞的實驗和使用方法介紹
發布日期:2021-08-25 點擊:1090
一、CoriellInstitute細胞實驗方法:
藥敏片的制備:一般情況下,如無法獲取,可以自行制備。首先定性濾紙,用內徑為6mm的打孔器制備好紙片,按每包100片包裝好,高壓滅菌,烘干備用。然后,將待檢藥物用蒸餾水按實際用量的10倍稀釋,充分溶解后,取1mL加到100片滅菌好的紙片上,放入4℃冰箱,待其充分吸收后(一般要4-8小時),平鋪于平皿上,在37℃溫箱中充分烘干,干燥后立即封裝于滅菌的小瓶內,密閉保存。
二、使用方法:
培養基的制備:用托盤天平稱取營養瓊脂4克,加入潔凈的容器內,再用量筒加入200mL蒸餾水,121℃,滅菌20分鐘。滅菌后,冷卻至50-60℃,在超凈臺內,迅速將培養基倒入滅菌的培養皿內,每個平皿15mL左右,輕搖平皿,使培養基分布均勻。待其冷卻凝固后,即可使用。
谷酰胺脫掉基后,可作為培養細胞的能量來源,參與蛋白質的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時,細胞生長不良而死亡。所以,各種培養液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩定,應置-20℃冰凍保存,用前加入培養基中。加有谷酰胺的液體培養基4度冰箱儲存兩周以上時,應重新加入原來量的谷酰胺。
CoriellInstitute細胞試驗操作中常配制高濃度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分裝使用,-20℃保存。使用時,每支1ml的谷酰胺加入到99ml*培養基中,使其濃度為2mM培養基。
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